Setiap pekerjaan memiliki resiko terjadinya kecelakaan kerja, salah satunya adalah petugas kebersihan. Upaya untuk meminimalisir kecelakaan akibat bekerja adalah diterpakanya sistem K3 (kesehatan dan keselamatan kerja), salah satu bagian dari K3 adalah penggunaan alat pelindung diri yang sesuai dengan resiko pekerjaan yang sedang dikerjakan. Petugas kebersihan merupakan pekerjaan yang setiap harinya terpapar dengan bahan kimia seperti pembersih toilet, kaca, dan pemebersih lantai. Penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi, menganalisis hubungan dan menganalisis faktor yang paling dominan mempengaruhi tingkat kepatuhan penggunaan alat pelindung diri pada petugas kerbersihan di Universitas Muhammadiyah Yogyakarta. Metode Penelitian: Jenis penelitian ini adalah non eksperimen dengan metode kuantitatif dan menggunakan desain deskriptif korelasional. Pendekatan yang digunakan adalah pendekatan cross sectional. Responden dalam penelitian ini berjumlah 85 responden dengan menggunakan tehnik total sampling. Analisis data menggunakan uji frequencies, uji chisquare dan dilanjutkan dengan uji regresi logistik. Hasil: distribusi frekuensi usia dengan kategori ≥ 34 tahun sebanyak 43 responden (50.6%), jenis kelamin sebagian besar laki-laki sebanyak 81 responden (95,3%), tingkat pendidikan dengan kategori tinggi sebanyak 62 responden (72.9%), masa kerja ≤ 5 tahun sebanyak 52 responden (61,2%), pengetahuan dengan kategori tinggi sebanyak 45 responden (52,9%), sikap buruk dengan kategori sebanyak 51 responden ( 60%), ketersediaan APD dengan kategori tersedia sebanyak 43 responden (50,6%), dorongan pemimpin dengan kategori buruk sebanyak 54 responden (63,5%), dorongan rekan kerja dengan kategori baik 46 responden (54,1%), dan kepatuhan dengan kategori tidak patuh sebanyak 43 responden (50,6%). Terdapat hubungan yang signifikan antara masa kerja dengan tingkat kepatuhan penggunaan alat pelindung diri dengan p value 0.037. Faktor yang paling berpengaruh dengan tingkat kepatuhan penggunaan alat pelindung diri adalah masa kerja dengan nilai OR = 0.356. Kesimpulan: Faktor yang paling mempengaruhi tingkat kepatuhan penggunaan alat pelindung diri adalah masa kerja.