Penelitian ini bertujuan untuk mengaji respon tanaman singkong Varietas Gambyong dengan waktu tanam yang berbeda di Kecamatan Ponjong, Kabupaten Gunungkidul. Penelitian telah dilakukan di Kecamatan Ponjong, Kabupaten Gunungkidul, Provinsi D.I Yogyakarta dan Laboratorium Penelitian Fakultas Pertanian, Universitas Muhammadiyah Yogyakarta pada bulan September 2017 sampai Mei 2018. Penelitian dilakukan menggunakan metode percobaan lapangan dengan rancangan percobaan faktor tunggal yang disusun dalam Rancangan Acak Kelompok Lengkap (RAKL). Perlakuan yang diuji adalah waktu tanam yang terdiri dari 3 perlakuan, yaitu tanam bulan September, tanam bulan Oktober, dan tanam bulan November. Parameter pengamatan terdiri dari tinggi tanaman, jumlah daun, luas daun, diameter batang, jumlah ubi, bobot per ubi, panjang ubi, diameter ubi, bobot ubi pertanaman, hasil ubi, kadar pati, dan kandungan HCN. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pertumbuhan dan hasil singkong Varietas Gambyong tertinggi diperoleh pada waktu tanam bulan September (15,07 ton/ha).