Penelitian ini dilakukan di Puskesmas Kecamatan Payung Kabupaten Bangka Selatan Provinsi Bangka Belitung. Tujuan Penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh budaya organisasi, motivasi dan kepuasan terhadap peningkatan kinerja pegawai di Puskesmas kecamatan Payung Kabupaten bangka Selatan Provinsi Bangka Belitung. Metode Penelitian dilakukan dengan pengumpulan data menggunakan kuesioner kemudian dianalisis dengan menggunakan uji statistik regresi berganda dengan jumlah responden sebanyak 55 pegawai. Hasil Penelitian menunjukkan bahwa semua variabel dalam pengujian item pada instrumen penelitian valid karena korelasi positif dan bernilai >0,632, sedangkan untuk reliabilitas bahwa semua instrumen penelitian memiliki nilai alpha Cronbach >0,600. Budaya organisasi menunjukkan nilai sig .049, kebutuhan berkuasa nilai sig .048, kebutuhan berafiliasi nilai sig .034, kebutuhan berprestasi nilai sig .043 dan kepuasan kerja .025. Dengan demikian nilai positif yang dihasilkan memiliki arti bahwa budaya organisasi, kebutuhan berkuasa, kebutuhan berafiliasi, kebutuhan berprestasi dan kepuasan kerja secara parsial memiliki pengaruh positif dan signifikan terhadap kinerja pegawai di Puskesmas Kecamatan Payung Kabupaten Bangka Selatan Provinsi Bangka Belitung.