Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan konsentrasi BAP dan NAA yang dapat memberikan respon terbaik terhadap pertumbuhan tunas Calliandra calothyrsus pada tahapan induksi tunas secara in vitro. Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Kultur Jaringan, Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi dan Pemuliaan Tanaman Hutan (BBPPBPTH) Yogyakarta. Penelitian ini dilaksanakan dengan metode eksperimental menggunakan rancangan faktorial yang disusun dalam Rancangan Acak Lengkap (RAL). Faktor pertama adalah konsentrasi BAP dengan empat aras yaitu 1 mg/l, 2 mg/l, 3 mg/l dan 4 mg/l. Faktor kedua adalah konsentrasi NAA dengan dua aras yaitu 0,1 mg/l dan 0,5 mg/l, dengan menggunakan 1 kontrol yaitu tanpa penambahan zat pengatur tumbuh (MS0). Medium yang digunakan yaitu medium MS (Murashige dan Skoog). Perlakuan yang diujikan adalah kombinasi BAP+NAA yang terdiri dari 8 aras dan 1 kontrol yaitu: BAP 0 mg/l + NAA 0 mg/l, BAP 1 mg/l + NAA 0,1 mg/l, BAP 2 mg/l + NAA 0,1 mg/l, BAP 3 mg/l + NAA 0,1 mg/l BAP, 4 mg/l + NAA 0,1 mg/l, BAP 1 mg/l + NAA 0,5 mg/l, BAP 2 mg/l + NAA 0,5 mg/l, BAP 3 mg/l + NAA 0,5 mg/l, BAP 4 mg/l + NAA 0,5 mg/l. Masing-masing perlakuan diulang sebanyak 5 kali sehingga diperoleh 45 unit perlakuan. Pengamatan dilakukan selama 8 minggu, parameter yang diamati meliputi: persentase eksplan hidup, browning, dan kontaminasi, serta tinggi tunas, jumlah daun dan jumlah tunas. Hasil penelitian menunjukkan bahwa konsentrasi 2 mg/l BAP memberikan jumlah dan tinggi tunas C. calothyrsus yang cenderung lebih baik dan konsentrasi 0,5 mg/l NAA cenderung memberikan respon terbaik terhadap pertumbuhan tunas C. calothyrsus secara in vitro.