Budaya organisasi merupakan suatu faktor penting yang dapat menjadi penentu keberhasilan suatu organisasi. Penelitian ini membahas mengenai internalisasi budaya Jawa dalam nilai-nilai inti budaya organisasi yang dijalankan oleh hotel Royal Ambarrukmo Yogyakarta. Tujuan dari penelitian ini untuk menganalisis dan mengkaji bagaimana budaya Jawa digunakan dan dijadikan landasan dalam nila-nilai inti budaya organisasi perusahaan yang dijalankan hotel Royal Ambarrukmo Yogyakarta. Metode penelitian yang digunakan dalam penelitian ini adalah deksriptif kualitatif dengan pengumpulan data melalui wawancara mendalam, observasi dan dokumentasi. Uji validitas data menggunkan triangulasi sumber yang berarti membandingkan dan mengecek balik tingkat kepercayaan infomasi yang diperoleh melalui waktu dan alat yang berbeda dalam penelitian kualitatif. Hasil penelitian menunjukkan bahwa terdapat lima nilai inti budaya organisasi yang dianut hotel Royal Ambarrukmo Yogyakarta yaitu reliable yang menggunakan nilai budaya Jawa unggah-unguh, ethok-ethok, wedi dan isin. Kemudian organized yang menggunakan nilai budaya Jawa alon-alon waton klakon. Lalu youthful yang menggunakan nlai budaya Jawa kebo nusu gudel sebagai salah satu nila inti budaya organisasi yang paling dominan. Lalu able yang menggunakan tarian khas adat Jawa, dan loyal yang tidak memiliki nilai-nilai budaya Jawa didalamnya dan nilai yang paling lemah. Internalisasi budaya Jawa dalam hotel Royal Ambarrukmo sudah cukup baik, meskipun penginternalisasian budaya Jawa tersebut masih kurang maksimal. Hal tersebut dikarenakan salah satu nilai inti budaya organisasi yang dianut tersebut tidak memiliki unsur nilai-nilai budaya Jawa didalamnya. Kemudian belum memiliki tolak ukur yang jelas terkait penerapan budaya Jawa dalam budaya organisasi yang dijalankan. Dan sosialisasi terkait budaya organisais yang dijalankan masih bisa lebih dimaksimalkan lagi. Namun sebagai hotel yang berusaha menjadi hotel yang berbasis pelestarian budaya hotel Royal Ambarrukmo Yogyakarta sudah cukup berhasil